详情描述:
蛋白层析系统是一种常用的分离和纯化蛋白质的方法,操作步骤及注意事项如下:
蛋白层析系统操作步骤
准备工作:准备好所需的层析柱、层析缓冲液、蛋白样品、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等试剂和设备。
样品加载:将蛋白样品加载到层析柱中,注意样品加载量不要过多,以避免超载。
洗涤:使用洗涤缓冲液洗脱非特异性结合的蛋白质,保持洗涤液的流速稳定。
洗脱:使用洗脱缓冲液逐步洗脱目标蛋白质,收集洗脱液中的目标蛋白质。
收集:收集洗脱液中的目标蛋白质,注意避免交叉污染和样品损失。
分析:对收集的目标蛋白质进行分析,如SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot等。
蛋白层析系统使用注意事项
保持实验环境清洁整洁,避免交叉污染。
严格按照操作步骤进行,避免操作失误。
注意层析柱的使用寿命和保养,及时更换老化的层析柱。
注意控制洗涤和洗脱缓冲液的pH值和离子强度,以保证蛋白质的稳定性。
注意避免气泡的产生,以保证流速的稳定性。
注意收集的目标蛋白质的保存条件,避免蛋白质降解或失活。
联系人 | 王培培 |
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